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不同PCR方法對豬偽狂犬病原檢出率的比較

發(fā)布時間:2016-10-09 15:10    作者:.    來源:    查看:
    豬偽狂犬病是影響豬群健康的重要疾病,在豬群中的發(fā)病率很高。該病可引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎和公豬的繁殖障礙,仔豬神經(jīng)癥狀及高死亡率。偽狂犬病毒的實驗室診斷有普通PCR、實時熒光PCR及ELISA等。本文就普通PCR和實時熒光PCR在偽狂犬病原檢測中的檢出率做一比較論述。

    1  材料與方法

   (1)偽狂犬疑似病料。豫北某豬場11月初產(chǎn)房的多群2~3日齡仔豬出現(xiàn)腹瀉癥狀,病仔豬皮膚發(fā)紅,體溫升高,精神不振,嘔吐,逐漸消瘦,部分病豬有神經(jīng)癥狀,出現(xiàn)發(fā)抖,后肢走路不穩(wěn),共濟(jì)失調(diào)。使用抗生素治療無效,病死率高達(dá)100%。采集病豬不同臟器、腦組織和腸內(nèi)容物等,共10頭份進(jìn)行檢測。

   (2)主要試劑。偽狂犬病毒PCR檢測試劑盒,購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司;偽狂犬病毒熒光PCR檢測試劑盒,購自廣州維伯鑫生物科技有限公司。

   (3)方法。對病料的處理以及PCR擴(kuò)增,參照試劑盒說明書進(jìn)行。

    2  結(jié)果

    應(yīng)用北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司偽狂犬病毒PCR檢測試劑盒,對采集的病料進(jìn)行病原學(xué)檢測,結(jié)果見圖1。

    應(yīng)用廣州維伯鑫生物科技有限公司偽狂犬病毒熒光PCR檢測試劑盒,對采集病料進(jìn)行病原學(xué)檢測,結(jié)果見圖2。

    3  結(jié)論

    同批樣品采用普通PCR檢測偽狂犬病毒,10份樣品中有3份陽性,陽性率為30%;采用熒光PCR檢測,10份樣品全為陽性,陽性率為100%。對比發(fā)現(xiàn),熒光PCR方法較普通PCR有更高的靈敏性和準(zhǔn)確性,而且操作更為簡單快速,但是對實驗要求也較高,容易污染,造成假陽性的發(fā)生,價格也較為昂貴。普通PCR則更為準(zhǔn)確,而且PCR擴(kuò)增產(chǎn)物可進(jìn)行回收用于下一步研究分析。兩種方法各有優(yōu)缺點,在獸醫(yī)臨床中應(yīng)配合使用,相得益彰。

   (陳光麗  河南省新鄉(xiāng)市動物疫病預(yù)防控制中心)

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