（1）供試菌株的分離鑒定與培養(yǎng)。從豐寧縣樂拓牧業(yè)公司羊場因腹瀉死亡的羔羊中取1只進行試驗研究，取肝臟做細菌分離，接種于普通營養(yǎng)瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24小時，挑取表面光滑、邊緣整齊、灰白色、半透明的小菌落， 接種于麥康凱瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24小時， 再從麥康凱瓊脂平板上挑取孤立的紅色菌落。將分離的單個菌落涂片革蘭氏染色、鏡檢，觀察到兩端鈍圓的小桿菌，單個或成對排列，革蘭氏染色陰性。將分離的菌株進行生化試驗。結(jié)果見表1。
注：⊕發(fā)酵糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣；+發(fā)酵糖產(chǎn)酸或?qū)嶒炾栃裕?不發(fā)酵糖或?qū)嶒炾幮?；?ⅹ遲緩發(fā)酵糖類。由表1可知，所分離的5個菌株均為羊的大腸桿菌。將分離鑒定后確定為大腸桿菌的菌落無菌接種在營養(yǎng)肉湯中37℃培養(yǎng)24小時，用滅菌生理鹽水稀釋10倍，備用。
（2）藥敏紙片。用6mm打孔器打出濾紙小圓片，160℃干熱滅菌1小時后按常規(guī)方法分別制備青霉素、鏈霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星和氟本尼考等藥敏紙片，備用。
（3）中藥。從本地醫(yī)藥公司采購白頭翁、蒼術(shù)、白術(shù)、黃芪、茯苓、澤瀉、大青葉、苦參、青皮和陳皮。
2 試驗方法
（1）制備藥液。將上述中藥加適量水煎煮30分鐘后過濾，水煎2次，將2次過濾的藥液合并濃縮成含生藥1g/mL的藥液備用。
（2）中藥藥敏試驗。采用平皿打洞法將供試藥液均勻涂布在瓊脂培養(yǎng)基表面，用直徑6mm打孔器在瓊脂平板上打孔（適當封閉孔底），將制備好的中藥供試液分別加入各孔內(nèi)（滿而不溢），貼上標記，置37℃溫箱培養(yǎng)24小時。
（3）抗菌藥敏試驗。將供試菌液均勻涂布于瓊脂培養(yǎng)基表面貼上標記，以無菌方法貼上各種藥敏實驗紙，置37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時。
（4）抑菌結(jié)果的判定。抑菌圈大于15mm以上為高度敏感，10～15mm為中度敏感，小于10mm為低度敏感，沒有抑菌圈為無效。
3 試驗結(jié)果
白頭翁對菌株呈高度敏感，黃芪呈中度敏感，其他中藥均呈低度敏感，苦參、大青葉對個別菌株無抑菌效果；慶大霉素、環(huán)丙沙星呈高度敏感，恩諾沙星中度敏感，氟苯尼考、磺胺嘧啶呈低度敏感，青霉素基本沒有抑菌作用。常用的抗生素對不同菌株間的抑菌效果具有一定的差異性，這種菌株差異比中藥明顯，說明在解決臨床耐藥菌株方面，中藥具有更好的效果，但是中草藥的敏感程度不如常用的抗生素藥物，需要進一步探討和研究兩者間如何合理有效地配合問題。
（河北省豐寧滿族自治縣農(nóng)牧局 李海燕、劉國文、葉和平）
